/ Tishinova LA // Matko. II Wszechrosyjski. kongres lekarzy medycyny sądowej: streszczenia. - Irkuck-M., 1987. — S. 264-266.

Ustalanie przynależności gatunkowej obiektów pochodzenia biologicznego

opis bibliograficzny:
Określenie przynależności gatunkowej obiektów pochodzenia biologicznego / Tishinova L.A. // Matko. II Wszechrosyjski. kongres lekarzy medycyny sądowej: streszczenia. - Irkuck-M., 1987. - S. 264-266.

Kod HTML:
/ Tishinova LA // Matko. II Wszechrosyjski. kongres lekarzy medycyny sądowej: streszczenia. - Irkuck-M., 1987. - S. 264-266.

kod do osadzenia na forum:
Określenie przynależności gatunkowej obiektów pochodzenia biologicznego / Tishinova L.A. // Matko. II Wszechrosyjski. kongres lekarzy medycyny sądowej: streszczenia. - Irkuck-M., 1987. - S. 264-266.

wiki:
/ Tishinova LA // Matko. II Wszechrosyjski. kongres lekarzy medycyny sądowej: streszczenia. - Irkuck-M., 1987. - S. 264-266.

W celu ustalenia przynależności gatunkowej śladów krwi i wydzielin w praktyce sądowej stosuje się badania immunologiczne, reakcję inicjacji w różnych modyfikacjach oraz reakcję immunofluorescencyjną. Wykorzystując reakcję immunofluorescencyjną ustala się również pochodzenie gatunkowe poszczególnych komórek. Możliwe są jednak sytuacje, w których testy te są nieskuteczne. Obserwuje się to w przypadkach, gdy badane obiekty były narażone na niekorzystne czynniki, w związku z którymi nastąpiło zniszczenie białka specyficznego dla gatunku lub zmiany uniemożliwiające jego wykrycie.

W związku z powyższym istnieje potrzeba opracowania dodatkowych metod ustalania przynależności gatunkowej obiektów pochodzenia biologicznego.

Szczególnie interesujący w tym aspekcie jest antygen H, który sądząc po danych literaturowych (M. Krire, 1956; W. Reimann, S. Popvassileff, 1960; A.K. Tumanov, 1975) jest zawarty we krwi ludzkiej, niezależnie od grupy przynależność zgodnie z systemem ABO, a także kategorią wydalania i nie występuje u zwierząt. Wiadomo, że ten antygen, który jest polisacharydem, jest bardziej odporny niż antygeny białkowe (GA Sergeeva, Yu.D. Alekseev, 1981; EI Koroleva, 1983).

Celem naszego badania jest określenie znaczenia antygenu H układu ABO jako specyficznego dla gatunku testu na ustalenie przynależności człowieka do obiektów biologicznych wykrytych na podstawie dowodów fizycznych.

W eksperymencie oznaczono antygen H w płynnej, wysuszonej krwi i ślinie, komórkach nabłonka policzkowego 132 dawców płci męskiej i żeńskiej w wieku od 26 do 56 lat ze wszystkich grup według systemu ABO, z których 16 było niewydzielniczych właściwości grupy. Badano również płynną i suchą krew 32 krów, 26 baranów, 24 świń, 26 psów, 7 kotów, 6 koni oraz komórki nabłonka policzka 8 psów i 4 kotów. W przypadku krwi płynnej reakcję aglutynacji zastosowano na płaszczyźnie iw probówkach przy użyciu surowicy heteroimmunologicznej anty-H. a także lektyny (wyciągi z owoców czarnego bzu, nasion miotły bezszypułkowej i fasoli Vaterer), do suchej krwi - reakcje wchłaniania aglutyniny w modyfikacji ilościowej i absorpcji-elucji z tymi samymi odczynnikami, ślina - reakcja absorpcji aglutyniny w modyfikacji ilościowej komórki - reakcja immunofluorescencyjna.

U wszystkich 132 dawców antygen H określono niezależnie od przynależności do grupy; było to równie wyraźnie widoczne we wszystkich reakcjach zarówno w rozświetlaczach, jak i bez rozświetlaczy, ale w tych ostatnich, gdy zastosowano RIF, odnotowano spadek liczby komórek świecących i jasności luminescencji.

U żadnego z badanych zwierząt (w reakcjach zastosowano powyższe lektyny, luminescencyjne surowice anty-owcze i heteroimmunologiczne anty-H) wykryto antygen H.

Znana literatura oraz własne dane dotyczące swoistości gatunkowej antygenu H pozwoliły nam zastosować ten test do określenia gatunku obiektów pochodzenia biologicznego w 7 obserwacjach z praktyki. W jednym z nich zbadano okostną, w czterech - wyizolowane komórki nabłonka skóry (przedmioty pobrano z ubrań, sprzączek pasów, traktorów, w ogniu), w dwóch - ślady krwi na skórze i klucz francuski. Nie było możliwe ustalenie przynależności gatunkowej tych obiektów na podstawie reakcji precypitacji, jednak antygen H wykrywano za pomocą immunofluorescencji i mieszanej reakcji aglutynacji.

Tak więc nasze obserwacje doświadczalne i praktyczne wskazują, że antygen H nie jest wykrywany u zwierząt, ale jest równie wyraźnie wykrywany w komórkach krwi i tkankach wszystkich ludzi, niezależnie od przynależności do grupy według systemu ABO i kategorii wydalania. Dlatego fakt obecności tego antygenu jest dodatkowym testem specyficznym dla gatunku, który pozwala ocenić, czy przedmiot należy do osoby. Na podstawie antygenu H można ustalić przynależność gatunkową wydzielin, a także krwi, tkanek ciała i izolowanych komórek.

Próba zamiany mięsa jednego gatunku na mięso innego, zwykle bardziej wartościowego, nazywana jest fałszowaniem gatunku i może mieć miejsce na rynkach w sieć handlowa i instytucje Żywnościowy. Dlatego weterynarz musi być w stanie określić gatunek mięsa. Zwykle w przypadku fałszowania gatunków wykorzystuje się tusze zwierząt o podobnej wielkości, kształcie i innych wskaźnikach. Dlatego zwykle starają się uchodzić za wołowinę i odwrotnie (w niektórych krajach, gdzie konina jest ceniona wyżej), tusze dużych psów uchodzi za owce, koty uchodzi za króliki i nutrie. Do określenia gatunku mięsa stosuje się metody obiektywne i subiektywne.

Subiektywne metody oznaczania gatunku mięsa. Do metod subiektywnych należą takie jak konfiguracja, wskaźniki morfologiczne i organoleptyczne mięsa itp. Czyli np. podczas oględzin tusza końska ma dłuższą szyję, dobrze umięśniony zad, natomiast w tuszach krowich szyja jest krótsza od zadu , bardziej płaskie, maklocks często wybrzuszenia i guzki kulszowe; Mięso końskie ma ciemniejszy kolor, chociaż starzejąca się lub słabo wykrwawiona wołowina może być ciemnoczerwona, mięso końskie ma wizualnie bielsze, duże i dobrze zdefiniowane włókna mięśniowe w porównaniu z wołowiną.

Tabela 1

Cechy gatunkowe budowy kości krowy i szkieletu konia

Obiektywne metody oznaczania gatunku mięsa metody oznaczania gatunku mięsa

Największe znaczenie mają obiektywne metody, którymi należy się posługiwać przy sporządzaniu oficjalnych opinii. Metody te obejmują: anatomiczne cechy budowy kości szkieletu, temperaturę topnienia tłuszczu, zawartość glikogenu w mięsie oraz reakcję strącania z gatunkowymi surowicami strącającymi.

Określenie przynależności gatunkowej według cech anatomicznych budowy kości szkieletu i narządów wewnętrznych

Po dowolnej kości szkieletu, a nawet po jej fragmencie można określić gatunek mięsa. Główny cechy charakterystyczne podobne kości szkieletu u porównywanych zwierząt przedstawiono w tabeli. 12.

Stół. 2

Cechy gatunkowe budowy kości szkieletu kota, królika i nutrii

Przy określaniu mięsa małych przeżuwaczy i psów należy wziąć pod uwagę fakt, że kości małych przeżuwaczy przypominają kształtem kości krowy.

Zgodnie z anatomicznymi cechami budowy narządów wewnętrznych możliwe jest również dokładne określenie gatunku mięsa i produktów uboju.

Wątroba krowy jest masywna, wypukło-wklęsła, ciemnobrązowa, lobulacja jest słabo wyrażona, po prawej stronie po stronie brzusznej znajduje się wycięcie międzypłatowe, w którym znajduje się pęcherzyk żółciowy. U konia duża wątroba jest wyraźnie podzielona na trzy płaty, prawy płat jest oddzielony od środkowego głębokim nacięciem, a lewy jest oddzielony od środkowego więzadłem okrągłym, pęcherzyka żółciowego nie ma. Wątroba psa jest większa niż u małego bydła, podzielona na siedem płatów. Płuca krowy mają wyraźny wzór siatki, są wyraźnie podzielone na płaty czaszkowe, środkowe i ogonowe, przedni płat czaszkowy jest podzielony na dwie połowy, w prawym płucu znajduje się dodatkowy płat. U konia lobulacja płuca jest słabo wyrażona, ostra krawędź każdego płuca ma delikatną szczelinę międzypłatową oddzielającą płat ogonowy od płata czaszkowego. U psów, w przeciwieństwie do owiec i kóz, wzór siatki na płucach jest niewidoczny, a płaty płuc są oddzielone głębokimi szczelinami międzypłatowymi, które biegną aż do oskrzeli.

Nerki krowy składają się z 16-18 płatów. U koni nerki są brodawkowate, lewa podłużna lub fasolkowata, a prawa sercowata.

Śledziona krowy jest płaska, wydłużona, o zaokrąglonych brzegach. Koń ma płaską śledzionę w kształcie półksiężyca. Przedni brzeg jest wklęsły i spiczasty, tylny wypukły i tępy. U psa śledziona jest płaska, nieregularnie trójkątna, jej dolny koniec jest rozszerzony, a górny zwężony.

Serce krowy ma ostrzejszy wierzchołek niż u konia, dodatkowo ściana lewej komory u konia jest 2,5 razy grubsza od prawej. Serce owiec i kóz ma szpiczasty wierzchołek, podczas gdy psy mają zaokrąglone serce.

Język krowy ma gruby, spiczasty koniec, w środkowej jednej trzeciej znajduje się zgrubienie wałkowate, nagłośnia w kształcie owalu. Język konia jest dłuższy i bardziej płaski, jego koniec zaokrąglony, nagłośnia zaokrąglona. U psów, w przeciwieństwie do małego bydła, język jest szeroki, płaski, ze spiczastymi krawędziami, na jego górnej powierzchni znajduje się środkowa bruzda.

Oznaczanie temperatury topnienia tłuszczu Temperatura topnienia tłuszczu jest ściśle indywidualna dla zwierząt różnych gatunków i dlatego jest obiektywnym wskaźnikiem do określenia gatunku mięsa. Co więcej, wskaźnik ten u porównywanych gatunków zwierząt różni się 1,5-2 razy, co znacznie ułatwia diagnozę.

Zestawienie reakcji Badany tłuszcz topi się i zbiera w przezroczystych szklanych kapilarach o średnicy 1,5 mm. Wysokość kolumny tłuszczu powinna wynosić 5-7 mm. Kapilary z tłuszczem zostaną umieszczone w lodówce na 1-2 godziny. Po schłodzeniu kapilarę z tłuszczem mocuje się gumką na termometrze w taki sposób, aby słupek tłuszczu znajdował się na wysokości głowicy termometru. Następnie termometr wraz z kapilarą jest mocowany na statywie i opuszczany do przezroczystej zlewki wypełnionej wodą i stojącej na kuchence elektrycznej tak, aby górna część kapilary znajdowała się nad powierzchnią wody (patrz ryc. I) . Następnie zaczynają podgrzewać wodę, mieszając ją szklanym prętem. Ogrzewanie trwa do momentu, gdy słupek tłuszczu stanie się przezroczysty i pod ciśnieniem wody zacznie się podnosić kapilary. W tym momencie weź odczyt termometru. Pomiar powtarza się pięć razy i uzyskuje się średnią arytmetyczną. Otrzymany wynik jest uważany za temperaturę topnienia badanego tłuszczu. Temperaturę topnienia tłuszczu niektórych ssaków i ptaków podano w tabeli. 3.

Oznaczanie zawartości glikogenu w mięśniach

W mięsie porównywanych zwierząt zawartość glikogenu różni się 2-3 krotnie. I tak np. zawartość glikogenu w mięsie koni, psów i kotów jest znacznie wyższa niż w mięsie krów, bydła małego i królików, co umożliwia wykorzystanie reakcji jakościowej na glikogen do określenia gatunku mięsa . Należy jednak pamiętać, że zawartość glikogenu nie jest stała i zależy od stanu zwierzęcia w momencie uboju, warunków dojrzewania oraz czasu przechowywania mięsa.

Stwierdzenie reakcji

Pobiera się próbkę badanego mięsa, rozgniata do stanu mięsa mielonego, zalewa wodą destylowaną w stosunku 1:4 i gotuje w kolbie przez 30 minut. Bulion jest filtrowany przez filtr papierowy i chłodzony. Do probówki wlać 5 ml bulionu i dodać 5-10 kropli płynu Lugola.

Rozliczanie reakcji

Przy pozytywnej reakcji (typowej dla konia, psa i kota) zawartość probówki zmienia kolor na wiśniowy lub liliowy.

Przy wątpliwej reakcji (zdarza się to u kotów) kolor będzie pomarańczowy

Przy negatywnej reakcji (typowej dla krów, owiec i kóz) zawartość probówki będzie żółta.

Reakcja opadowa z surowicami specyficznymi dla gatunku

Reakcja z wytrącającymi się surowicami specyficznymi dla gatunku jest jedną z najdokładniejszych metod identyfikacji gatunku mięsa. Za pomocą tej reakcji można badać nie tylko mięso, ale także mięso mielone, a nawet półprodukty i określać dodatek do tych produktów mięsa z innego gatunku zwierzęcia.

Zestawienie odczynu 4z badanego mięsa, mięsa mielonego, półproduktów, sporządza się ekstrakt. W tym celu próbkę produktu rozdrabnia się do stanu mięsa mielonego i zalewa 0,9% roztworem chlorku sodu w stosunku 1:1 i ekstrahuje się przez 3 godziny, po czym jest filtrowana przez filtr papierowy (ekstrakt powinny być przejrzyste).

Temperatura topnienia tłuszczu zwierzęcego różnych gatunków

Optymalny do rozpoczęcia reakcji jest stosunek białka i ekstraktu 1:1000.

Aby przygotować reakcję, trzy rzędy probówek Ulenguta umieszcza się w statywie. Za pomocą pipety pobiera się 0,9 ml ekstraktu testowego do probówek pierwszego rzędu, 0,9 ml 0,9% roztworu chlorku sodu do probówek drugiego rzędu i 0,9 ml standardowych surowic różnych gatunków zwierząt do probówek. probówki trzeciego rzędu o takim samym rozcieńczeniu jak wytrącające surowice diagnostyczne. Następnie za pomocą pipety Pasteura do każdej z trzech probówek dodaje się 0,1 ml surowicy diagnostycznej wytrącającej się z białkiem tego gatunku zwierząt.

Rozliczanie reakcji

Rozliczenie reakcji przeprowadza się po 10 minutach. Reakcję uważa się za wiarygodną, ​​jeśli zawartość probówki z solą fizjologiczną pozostaje klarowna, aw probówce ze standardową surowicą tworzy się wytrącający się pierścień.

Jeśli ten sam pierścień powstaje w probówce z badanym ekstraktem, reakcję uważa się za pozytywną i ustala się gatunek mięsa. Jeśli zawartość tej probówki pozostaje czysta, reakcję uważa się za negatywną i kontynuuje się badania z surowicami innych gatunków zwierząt.

3 OZNACZANIE GATUNKÓW MIĘSA

Próba zamiany mięsa jednego gatunku na mięso innego, zwykle bardziej wartościowego, nazywana jest fałszowaniem gatunkowym i może mieć miejsce na targach w sieci handlowej i placówkach gastronomicznych. Dlatego weterynarz musi być w stanie określić gatunek mięsa. Zwykle w przypadku fałszowania gatunków wykorzystuje się tusze zwierząt o podobnej wielkości, kształcie i innych wskaźnikach. Dlatego zwykle starają się uchodzić za wołowinę i odwrotnie (w niektórych krajach, gdzie konina jest ceniona wyżej), tusze dużych psów uchodzi za owce, koty uchodzi za króliki i nutrie. Do określenia gatunku mięsa stosuje się metody obiektywne i subiektywne.

Subiektywne metody oznaczania gatunku mięsa. Do metod subiektywnych należą takie jak konfiguracja, wskaźniki morfologiczne i organoleptyczne mięsa itp. Czyli np. podczas oględzin tusza końska ma dłuższą szyję, dobrze umięśniony zad, natomiast w tuszach krowich szyja jest krótsza od zadu , bardziej płaskie, maklocks często wybrzuszenia i guzki kulszowe; Mięso końskie ma ciemniejszy kolor, chociaż starzejąca się lub słabo wykrwawiona wołowina może być ciemnoczerwona, mięso końskie ma wizualnie bielsze, duże i dobrze zdefiniowane włókna mięśniowe w porównaniu z wołowiną.

Tabela 1

Cechy gatunkowe budowy kości krowy i szkieletu konia

Obiektywne metody oznaczania gatunku mięsa metody oznaczania gatunku mięsa

Największe znaczenie mają obiektywne metody, którymi należy się posługiwać przy sporządzaniu oficjalnych opinii. Metody te obejmują: anatomiczne cechy budowy kości szkieletu, temperaturę topnienia tłuszczu, zawartość glikogenu w mięsie oraz reakcję strącania z gatunkowymi surowicami strącającymi.

Określenie przynależności gatunkowej według cech anatomicznych budowy kości szkieletu i narządów wewnętrznych

Po dowolnej kości szkieletu, a nawet po jej fragmencie można określić gatunek mięsa. Główne wyróżniki podobnych kości szkieletowych u porównywanych zwierząt przedstawiono w tabeli. 12.

Stół. 2

Cechy gatunkowe budowy kości szkieletu kota, królika i nutrii

Przy określaniu mięsa małych przeżuwaczy i psów należy wziąć pod uwagę fakt, że kości małych przeżuwaczy przypominają kształtem kości krowy.

Zgodnie z anatomicznymi cechami budowy narządów wewnętrznych możliwe jest również dokładne określenie gatunku mięsa i produktów uboju.

Wątroba krowy jest masywna, wypukło-wklęsła, ciemnobrązowa, lobulacja jest słabo wyrażona, po prawej stronie po stronie brzusznej znajduje się wycięcie międzypłatowe, w którym znajduje się pęcherzyk żółciowy. U konia duża wątroba jest wyraźnie podzielona na trzy płaty, prawy płat jest oddzielony od środkowego głębokim nacięciem, a lewy jest oddzielony od środkowego więzadłem okrągłym, pęcherzyka żółciowego nie ma. Wątroba psa jest większa niż u małego bydła, podzielona na siedem płatów. Płuca krowy mają wyraźny wzór siatki, są wyraźnie podzielone na płaty czaszkowe, środkowe i ogonowe, przedni płat czaszkowy jest podzielony na dwie połowy, w prawym płucu znajduje się dodatkowy płat. U konia lobulacja płuca jest słabo wyrażona, ostra krawędź każdego płuca ma delikatną szczelinę międzypłatową oddzielającą płat ogonowy od płata czaszkowego. U psów, w przeciwieństwie do owiec i kóz, wzór siatki na płucach jest niewidoczny, a płaty płuc są oddzielone głębokimi szczelinami międzypłatowymi, które biegną aż do oskrzeli.

Nerki krowy składają się z 16-18 płatów. U koni nerki są brodawkowate, lewa podłużna lub fasolkowata, a prawa sercowata.

Śledziona krowy jest płaska, wydłużona, o zaokrąglonych brzegach. Koń ma płaską śledzionę w kształcie półksiężyca. Przedni brzeg jest wklęsły i spiczasty, tylny wypukły i tępy. U psa śledziona jest płaska, nieregularnie trójkątna, jej dolny koniec jest rozszerzony, a górny zwężony.

Serce krowy ma ostrzejszy wierzchołek niż u konia, dodatkowo ściana lewej komory u konia jest 2,5 razy grubsza od prawej. Serce owiec i kóz ma szpiczasty wierzchołek, podczas gdy psy mają zaokrąglone serce.

Język krowy ma gruby, spiczasty koniec, w środkowej jednej trzeciej znajduje się zgrubienie wałkowate, nagłośnia w kształcie owalu. Język konia jest dłuższy i bardziej płaski, jego koniec zaokrąglony, nagłośnia zaokrąglona. U psów, w przeciwieństwie do małego bydła, język jest szeroki, płaski, ze spiczastymi krawędziami, na jego górnej powierzchni znajduje się środkowa bruzda.

Oznaczanie temperatury topnienia tłuszczu Temperatura topnienia tłuszczu jest ściśle indywidualna dla zwierząt różnych gatunków i dlatego jest obiektywnym wskaźnikiem do określenia gatunku mięsa. Co więcej, wskaźnik ten u porównywanych gatunków zwierząt różni się 1,5-2 razy, co znacznie ułatwia diagnozę.

Zestawienie reakcji Badany tłuszcz topi się i zbiera w przezroczystych szklanych kapilarach o średnicy 1,5 mm. Wysokość kolumny tłuszczu powinna wynosić 5-7 mm. Kapilary z tłuszczem zostaną umieszczone w lodówce na 1-2 godziny. Po schłodzeniu kapilarę z tłuszczem mocuje się gumką na termometrze w taki sposób, aby słupek tłuszczu znajdował się na wysokości głowicy termometru. Następnie termometr wraz z kapilarą jest mocowany na statywie i opuszczany do przezroczystej zlewki wypełnionej wodą i stojącej na kuchence elektrycznej tak, aby górna część kapilary znajdowała się nad powierzchnią wody (patrz ryc. I) . Następnie zaczynają podgrzewać wodę, mieszając ją szklanym prętem. Ogrzewanie trwa do momentu, gdy słupek tłuszczu stanie się przezroczysty i pod ciśnieniem wody zacznie się podnosić kapilary. W tym momencie weź odczyt termometru. Pomiar powtarza się pięć razy i uzyskuje się średnią arytmetyczną. Otrzymany wynik jest uważany za temperaturę topnienia badanego tłuszczu. Temperaturę topnienia tłuszczu niektórych ssaków i ptaków podano w tabeli. 3.

Oznaczanie zawartości glikogenu w mięśniach

W mięsie porównywanych zwierząt zawartość glikogenu różni się 2-3 krotnie. I tak np. zawartość glikogenu w mięsie koni, psów i kotów jest znacznie wyższa niż w mięsie krów, bydła małego i królików, co umożliwia wykorzystanie reakcji jakościowej na glikogen do określenia gatunku mięsa . Należy jednak pamiętać, że zawartość glikogenu nie jest stała i zależy od stanu zwierzęcia w momencie uboju, warunków dojrzewania oraz czasu przechowywania mięsa.

Stwierdzenie reakcji

Pobiera się próbkę badanego mięsa, rozgniata do stanu mięsa mielonego, zalewa wodą destylowaną w stosunku 1:4 i gotuje w kolbie przez 30 minut. Bulion jest filtrowany przez filtr papierowy i chłodzony. Do probówki wlać 5 ml bulionu i dodać 5-10 kropli płynu Lugola.

Rozliczanie reakcji

Przy pozytywnej reakcji (typowej dla konia, psa i kota) zawartość probówki zmienia kolor na wiśniowy lub liliowy.

Przy wątpliwej reakcji (zdarza się to u kotów) kolor będzie pomarańczowy

Przy negatywnej reakcji (typowej dla krów, owiec i kóz) zawartość probówki będzie żółta.

Reakcja opadowa z surowicami specyficznymi dla gatunku

Reakcja z wytrącającymi się surowicami specyficznymi dla gatunku jest jedną z najdokładniejszych metod identyfikacji gatunku mięsa. Za pomocą tej reakcji można badać nie tylko mięso, ale także mięso mielone, a nawet półprodukty i określać dodatek do tych produktów mięsa z innego gatunku zwierzęcia.

Zestawienie odczynu 4z badanego mięsa, mięsa mielonego, półproduktów, sporządza się ekstrakt. W tym celu próbkę produktu rozdrabnia się do stanu mięsa mielonego i zalewa 0,9% roztworem chlorku sodu w stosunku 1:1 i ekstrahuje się przez 3 godziny, po czym jest filtrowana przez filtr papierowy (ekstrakt powinny być przejrzyste).

Temperatura topnienia tłuszczu zwierzęcego różnych gatunków

Optymalny do rozpoczęcia reakcji jest stosunek białka i ekstraktu 1:1000.

Aby przygotować reakcję, trzy rzędy probówek Ulenguta umieszcza się w statywie. Za pomocą pipety pobiera się 0,9 ml ekstraktu testowego do probówek pierwszego rzędu, 0,9 ml 0,9% roztworu chlorku sodu do probówek drugiego rzędu i 0,9 ml standardowych surowic różnych gatunków zwierząt do probówek. probówki trzeciego rzędu o takim samym rozcieńczeniu jak wytrącające surowice diagnostyczne. Następnie za pomocą pipety Pasteura do każdej z trzech probówek dodaje się 0,1 ml surowicy diagnostycznej wytrącającej się z białkiem tego gatunku zwierząt.

Rozliczanie reakcji

Rozliczenie reakcji przeprowadza się po 10 minutach. Reakcję uważa się za wiarygodną, ​​jeśli zawartość probówki z solą fizjologiczną pozostaje klarowna, aw probówce ze standardową surowicą tworzy się wytrącający się pierścień.

Jeśli ten sam pierścień powstaje w probówce z badanym ekstraktem, reakcję uważa się za pozytywną i ustala się gatunek mięsa. Jeśli zawartość tej probówki pozostaje czysta, reakcję uważa się za negatywną i kontynuuje się badania z surowicami innych gatunków zwierząt.

Organizacja i metodyka poubojowych badań weterynaryjno-sanitarnych tusz i narządów wewnętrznych zwierząt rolniczych i dzikich zwierząt łownych (ptaków)

Certyfikat na formularzu nr 2, bez którego wyroby nie są dopuszczone do kontroli i sprzedaży. Pomoc jest nieważna. Badaniu weterynaryjno-sanitarnym na rynku poddaje się: - mięso wszystkich rodzajów zwierząt rzeźnych, w tym drobiu i królików, a także mięso zwierząt łownych i ptactwa łownego w postaci schłodzonej, schłodzonej, zamrożonej lub solonej (narządy wewnętrzne i inne podroby ...

Mięso i podroby zwierząt ugryzionych przez węże, ptaszniki i skorpiony są również wypuszczane na pokarm bez ograniczeń, ale te tkanki, do których wniknęła trucizna, są usuwane. 4. Cechy badania weterynaryjno-sanitarnego mięsa i przetworów mięsnych na rynkach spożywczych (dokumentacja, zasady dostaw, kolejność kontroli i metody badań). Weterynaryjne badanie sanitarne tusz i narządów wewnętrznych przeprowadza...

... ; 3) kontrolować jakość produktów wprowadzanych na rynek; 4) zapobiegać rozprzestrzenianiu się chorób zakaźnych i pasożytniczych poprzez produkty pochodzenia zwierzęcego. Badania weterynaryjno-sanitarne i technologia produktów zwierzęcych jako dyscyplina naukowa uwzględnia również zagadnienia higieny i technologii produktów spożywczych i surowców pochodzenia zwierzęcego (mięso, ...

W praktyce lekarza weterynarii zdarzają się przypadki, gdy konieczne jest rozróżnienie mięsa owczego (kozy) i psa, królika (zająca) i kota, bydła i koni. Znaki różnicowe mogą służyć jako zewnętrzne wskaźniki: obecność włosów, anatomiczna różnica kości, fizykochemiczne stałe tłuszczu, jakościowe i ilościowe oznaczanie glikogenu oraz reakcja strącania.
Barwa i struktura tkanki mięśniowej nie są wystarczająco wiarygodnymi kryteriami dla gatunku mięsa, ponieważ różnią się w zależności od płci, wieku, otłuszczenia zwierząt i innych przyczyn.

Główne różnice między mięsem różnych zwierząt przedstawiono w tabelach 1, 2, 3.
Ponadto przy dostarczaniu na rynek tusz domowych królików i zajęcy ubitych na jednej z tylnych nóg poniżej stawu skokowego należy pozostawić skórę nienaruszoną (co najmniej 3 cm).

odpowiedź na glikogen. W dojrzewającym mięsie różnych zwierząt glikogen zawarty jest w następujących ilościach: wołowina - 0,2-0,3% (w przybliżeniu taka sama ilość w jagnięcinie i wieprzowinie), mięso końskie - około 1, mięso psie - około 2, mięso kota - około 0,5 %. Dlatego reakcja na glikogen służy do odróżnienia jagnięciny od mięsa psów i koniny od wołowiny.
Przebieg oznaczenia: próbkę mięsa (15 g) rozdrabnia się nożyczkami w moździerzu, przenosi do kolby i dodaje 60 ml wody destylowanej. Próbka mięsa może być większa lub mniejsza, ale stosunek mięsa do wody powinien wynosić 1:4. Zawartość kolby doprowadzić do wrzenia i gotować przez 30 minut. Bulion jest filtrowany przez filtr papierowy i chłodzony.
Wlej 5 ml filtratu do probówki i dodaj 5-10 kropli płynu Lugola.
Z pozytywną reakcją bulion zmienia kolor na wiśniowy.
przy negatywie - na żółto, przy wątpliwym - na pomarańczowo.
Mięso psa, konia, wielbłąda, niedźwiedzia i kota w większości przypadków daje pozytywną reakcję na glikogen (wyciąg z mięsa kota może również zmienić kolor na pomarańczowy).
Mięso owiec, kóz, bydła, królików i świń na glikogen daje negatywną reakcję.
Należy pamiętać, że mięso młodych zwierząt wszelkiego rodzaju daje pozytywną reakcję na glikogen, ale mięso zwierząt starych i chorych, a także pobrane z okolicy głowy i szyi z reguły daje reakcję negatywną do glikogenu.
Tabela 1.

Tabela 2.

Tabela 3

Reakcja wytrącania. Za pomocą reakcji strącania możliwe jest rozpoznanie gatunku mięsa nawet w przypadkach, gdy zostało poddane soleniu, mrożeniu lub obróbce cieplnej.
Wstępnie ustala się miano strącających się surowic i określa ich specyficzność. Miano surowicy sprawdza się w następujący sposób: seryjne rozcieńczenia 1:100, 1:1000, 1:5000, 1:10000 i dalsze wykonuje się z normalnej surowicy krwi określonego zwierzęcia (w zależności od miana wskazanego na etykiecie ampułki) . Rozcieńczenia wykonuje się w małych probówkach (wygodniej jest mieć zwężający się koniec). Do 0,9 ml n. Surowicę we wskazanych rozcieńczeniach dodaje się pipetą Pasteura do 0,1 ml wytrącającej się surowicy. Nakładanie warstw można wykonać jedną pipetą, zaczynając od minimalnego rozcieńczenia. Specyficzność wytrącającej się surowicy określa się w ten sam sposób, ale z surowicami różnych zwierząt.
Wytrącająca się surowica jest uważana za odpowiednią, jeśli ma miano 1:10000. to znaczy wytrąca białko surowicy zwierzęcia gatunku, dla którego jest wykonane, w rozcieńczeniu 1: 10 000 przez 10 minut i nie wytrąca się z surowicami innych gatunków zwierząt w rozcieńczeniu 1: 1000 przez 1 godzinę .
Najpierw przygotuj badany ekstrakt (ekstrakt). Próbka badanego mięsa jest starannie oczyszczona z tłuszczu i tkanki łącznej, drobno rozdrobniona w porcelanowym moździerzu, umieszczona w szerokiej probówce. Następnie zawartość korka zalewa się solą fizjologiczną tak, aby pokryła mięso kilkumilimetrową warstwą. Rurka nie jest wstrząśnięta. Surowe mięso jest ekstrahowane przez 3 godziny, suszone (suszone) i gotowane przez 24 h. Następnie ekstrakt jest odsysany za pomocą pipety i przepuszczany przez sterylny filtr papierowy lub odwirowywany do całkowitego przeźroczystości.
Stężenie białka w ekstrakcie powinno wynosić około 1:1 000. Określa się to w następujący sposób: do ekstraktu zanurza się szklaną kapilarę o długości około 10 cm, która dzięki kapilarności unosi się wzdłuż rurki (nie do końca). Następnie ta sama kapilara jest wprowadzana ukośnie do stężonego kwasu azotowego wylanego na szkiełko zegarkowe. Kwas azotowy, podobnie jak ekstrakt, wchodzi do naczyń włosowatych. W miejscu kontaktu cieczy w kapilarze tworzy się osad białkowy w postaci białego pierścienia. Jeśli osad jest gęsty i masywny, ekstrakt należy rozcieńczyć solą fizjologiczną i powtórzyć test. Odbywa się to do momentu, gdy biały pierścień skoagulowanego białka jest ledwo widoczny. Całkowity brak osadu podczas ustawiania testu kapilarnego wskazuje, że stężenie białka w ekstrakcie jest mniejsze niż 1:1000. Przy takim ekstrakcie można ustawić reakcję, ponieważ miano wytrącających się surowic jest wyższe niż I:1000.
Postęp definicji. Przygotuj 4-7 rzędów małych rurek, trzy rurki z rzędu. Do pierwszych probówek w każdym rzędzie wlewa się 0,9 ml ekstraktu z badanego mięsa, do drugich 0,9 ml roztworu soli fizjologicznej, a do trzeciego taką samą objętość normalnych surowic różnych zwierząt. Serum są pobierane w rozcieńczeniu 1: 1000.
We wszystkich trzech probówkach pierwszego rzędu 0,1 ml surowicy, wytrącając białko krowie, nakłada się różnymi pipetami Pasteura, 0,1 ml surowicy, wytrącając białko końskie, w probówkach drugiego rzędu 0,1 ml wytrącającej się surowicy świńskiej, w probówki trzeciego rzędu, w probówkach pozostałych rzędów - na taką samą ilość surowic owczej, koziej i psiej.
Reakcję odczytuje się na ciemnym tle. Pozytywną reakcją jest pojawienie się w miejscu kontaktu cieczy w ciągu pierwszych minut po dodaniu wytrącającego serum mętnego białego pierścienia.
Reakcja będzie specyficzna, jeśli w ciągu 1 godziny po dodaniu wytrącającej się surowicy do ekstraktu pojawi się mętny biały pierścień. Opady po 1 godzinie są uważane za niespecyficzne.
Dodatnia reakcja w pierwszej i trzeciej probówce z tego samego rzędu wskazuje, że badane mięso należy do zwierzęcia, które odpowiada specyficzności surowicy. We wszystkich pozostałych rzędach w pierwszych probówkach reakcja powinna być ujemna, aw trzecim pozytywna. W drugich probówkach wszystkich rzędów (próbka kontrolna z solą fizjologiczną) reakcja powinna być ujemna.
Na przykład, jeśli badany ekstrakt okazał się być sporządzony z mięsa końskiego, to wynik reakcji we wszystkich probówkach powinien wyglądać następująco:

Tabela 4

Przynależność gatunkowa mięsa zwierząt domowych, dzikich i drobiu jest ustalana w celu rozwiązywania problemów sądowych

Ekspertyza weterynaryjna w przypadkach wzajemnej zamiany mięsa (fałszowanie), kłusownictwa, kradzieży.

Istnieją wstępne i wiarygodne (dokładne) metody] określania gatunku mięsa.

Wskaźnikami są: temperatura topnienia i krzepnięcia tłuszczu badanego mięsa, liczba jodowa, gęstość, współczynnik załamania; obecność (odczyn jakościowy) i stężenie glikogenu w tkance mięśniowej, wskaźniki organoleptyczne tłuszczu i mięsa.:

Za wiarygodne (dokładne) metody oznaczania gatunku mięsa uważa się ustawienie reakcji strącania (np. obecność surowic hiperimmunizacyjnych) i cechy anatomiczne! struktura kości szkieletu (jeśli występuje).

Niektóre wskaźniki fizykochemiczne różnych rodzajów jadalnych tłuszczów topionych podano w tabeli. 13.

Oznaczanie temperatury topnienia tłuszczu. Stopiony i przefiltrowany tłuszcz badanej próbki zbiera się do czystej, suchej szklanej kapilary o średnicy 1,4-1,5 mm. Długość słupka tłuszczu w kapilarze powinna wynosić około 20 mm. Kapilara do całkowitego zestalenia się tłuszczu jest przechowywana przez 1-2 godziny w domowej lodówce lub na lodzie. Po schłodzeniu odcina się (odłamywać) koniec kapilary wypełnionej tłuszczem, pozostawiając kolumnę tłuszczu o długości co najmniej 5 mm. Kapilara jest przymocowana gumowym pierścieniem do termometru chemicznego w taki sposób, aby jej koniec wypełniony tłuszczem był skierowany do góry, a wolny od tłuszczu - w dół. Termometr z kapilarą umieszcza się w probówce (średnica 20-25 mm) i mocuje w niej korkiem z otworem na termometr. Termometr nie powinien dotykać ścianek probówki. Probówkę mocuje się na statywie zanurzonym w szklance wody, przy czym poziom wody w szklance powinien znajdować się powyżej górnego końca kapilary. Woda w szklance jest powoli podgrzewana i na ciemnym tle przez szkło powiększające obserwuje się odczyt termometru i stan tłuszczu w kapilarze. Odczyt termometru w momencie, gdy tłuszcz zaczyna spływać po kapilarze i w jej górnej części tworzy się wolna przestrzeń, odnotowywany jest jako temperatura topnienia tłuszczu. Oznaczenie wykonuje się dwukrotnie, a wynikiem jest średnia arytmetyczna z dwóch testów, nie powinny różnić się o więcej niż 0,5°C.

Oznaczanie temperatury płynięcia tłuszczu. Temperatura krzepnięcia to najwyższa temperatura, która przez krótki czas pozostaje stała podczas przejścia tłuszczu ze stanu ciekłego do stanu stałego. Temperatura zamarzania zależy od skład chemiczny tłuszczu i służy nie tylko do oceny stopnia czystości tłuszczów, ale także do przybliżonego określenia gatunku. Tłuszcz testowy topi się w łaźni wodnej, filtruje, suszy i wlewa do probówki. Temperatura tłuszczu powinna być o 12-15°C wyższa od oczekiwanej temperatury krzepnięcia. Probówkę zamyka się korkiem, do którego wkłada się termometr ze skalą podzieloną na piąte lub dziesiąte stopnia. Termometr jest wzmocniony tak, że jego kulka rtęciowa znajduje się w środku warstwy tłuszczu i nie styka się ze ściankami i dnem probówki.

Probówka jest mocowana w gardle słoik aby nie dotykał dna; słoik zanurza się w naczyniu z wodą i lodem.

Roztopiony tłuszcz miesza się termometrem do równomiernego ostygnięcia. Po utracie przezroczystości tłuszczu termometr pozostawia się sam i co 2 minuty odnotowuje się spadek temperatury.

Od momentu wykrystalizowania tłuszczu spadek temperatury zwalnia, po czym może utrzymywać się na tym samym poziomie lub nieznacznie wzrosnąć i ponownie opaść. Ponieważ tłuszcze nie są czystymi substancjami, ich temperatura krzepnięcia jest niestabilna.

Za temperaturę jego krzepnięcia przyjmuje się maksymalny odczyt termometru obserwowany podczas krystalizacji tłuszczu.

Wyznaczanie współczynnika załamania (załamania) tłuszczu. Badany tłuszcz musi być w stanie płynnym, aby gęste tłuszcze zwierzęce były topione. Oznaczanie odbywa się za pomocą różnych refraktometrów. Właściwości załamania światła (załamania) tłuszczu zależą od ilości zawartych w nim trójglicerydów, nasyconych i nienasyconych kwasów tłuszczowych.

Najpierw refraktometr jest ustawiony na wodę destylowaną (n = 1,333). Współczynnik załamania tłuszczu znajduje się w temperaturze bliskiej jego temperaturze topnienia. Jeżeli temperatura topnienia jest wyższa niż 20°C, to współczynnik załamania jest obliczany ponownie według wzoru n 20°C = n + (TC - 20°C) 0,00035, gdzie n 20°C jest współczynnikiem załamania w 20°C; n jest współczynnikiem załamania światła w badanej temperaturze; (TC - 20°C) - różnica temperatur; 0,00035 jest wartością stałą.

Kroplę badanego tłuszczu nanosi się na dolny pryzmat refraktometru. Oświetlacz kieruje wiązkę światła na oświetlający pryzmat. Obserwuj przez okular.

Ustala się podział skali, przez który przechodzi granica światłocienia - będzie to współczynnik załamania badanego tłuszczu.

Oznaczanie liczby jodowej tłuszczu. Na podstawie wartości tego wskaźnika ocenia się przewagę nasyconych lub nienasyconych kwasów tłuszczowych w tłuszczu. Im więcej nienasyconych kwasów tłuszczowych zawiera tłuszcz, tym wyższa jest jego liczba jodowa.

Tłuszcze ogniotrwałe mają niską liczbę jodową, tłuszcze niskotopliwe - wysoką, dlatego przez wartość liczby jodowej można z grubsza określić ich gatunek.

odpowiedź na glikogen. W dojrzałym mięsie różnych zwierząt glikogen jest zawarty w następujących ilościach: wołowina - 0,2-0,3% (w przybliżeniu taka sama ilość w jagnięcinie i wieprzowinie), mięso końskie - około 1,0; mięso psa - około 2,0; mięso kota - około 0,5%. Dlatego jakościową reakcję na glikogen stosuje się do odróżnienia jagnięciny od mięsa psa, koniny od wołowiny.

Przebieg oznaczenia: próbkę mięsa (15 g) rozdrabnia się nożyczkami, przenosi do kolby i dodaje 60 ml wody destylowanej. Próbka mięsa może być mniej więcej, ale stosunek mięsa do wody

Powinien wynosić 1:4. Zawartość kolby doprowadzić do wrzenia i gotować przez 30 minut. Bulion jest filtrowany przez filtr papierowy i chłodzony.

Wlej 5 ml filtratu do probówki i dodaj 5-10 kropli płynu Lugola. Przy pozytywnej reakcji bulion staje się wiśniowo czerwony, z negatywem - żółtym, z wątpliwym - pomarańczowym.

Mięso psa, konia, wielbłąda, niedźwiedzia, kota w większości przypadków daje pozytywną reakcję na glikogen (wyciąg z mięsa kota może dawać wątpliwą reakcję).

Mięso owiec, kóz, bydła, królików i świń na glikogen daje negatywną reakcję.

Należy pamiętać, że mięso młodych zwierząt wszelkiego rodzaju daje pozytywną reakcję na glikogen, ale mięso zwierząt starych i chorych, a także pobrane z głowy i szyi, z reguły daje negatywną reakcję na glikogen.

Reakcja wytrącania. Polega na wytrąceniu osadu białkowego pod wpływem wytrącającej się surowicy na odpowiedni antygen. Jest to najdokładniejsza metoda określania gatunku mięsa. Ta metoda pozwala określić gatunek mięsa, nawet solonego lub ugotowanego.

Do uruchomienia reakcji niezbędny jest zestaw odpowiednich surowic wytrącających, a także normalna surowica krwi od zwierząt różnych gatunków. Są one wytwarzane w Instytucie Badawczym Szczepionek i Serum w Petersburgu i wysyłane do konsumentów na żądanie za pobraniem. W celu długotrwałego przechowywania chloroform nakłada się pod serum i wlewa do kolb ze zmielonymi korkami. Wstępnie ustala się miano strącających się surowic i określa ich specyficzność.

Miano wytrącającej się surowicy sprawdza się w następujący sposób. Normalna surowica niektórych gatunków zwierząt jest inaktywowana w temperaturze 56°C przez 30 minut z nieswoistych przeciwciał. Następnie rozcieńcza się solą fizjologiczną 1:100, 1:1000, 1:5000 i 1:10000, w zależności od miana wskazanego na etykiecie ampułki z wytrącającą się surowicą vidospecyficzną.

0,9 ml normalnej surowicy z każdego rozcieńczenia przenosi się do probówek Ulengut za pomocą pipety. Następnie za pomocą pipety Pasteura do każdej probówki dodaje się 0,1 ml wytrącającej się surowicy. Nakładanie warstw można wykonać za pomocą jednej pipety Pasteura, zaczynając od maksymalnego rozcieńczenia surowicy.

Za odpowiednią do badań uważa się wytrącającą rotę, która w rozcieńczeniu 1: 10 000 wytrąca białko surowicy tego samego gatunku przez 10 minut i nie wytrąca się z surowicami innych gatunków zwierząt w rozcieńczeniu 1: 10 000 przez godzina

Z mięsa testowego przygotowuje się ekstrakt. Badana próbka jest starannie oczyszczana z tłuszczu i tkanki łącznej, kreda jest kruszona i umieszczana w probówce; tam wlewa się fizjol
Aby rozpocząć reakcję strącania, przygotowuje się kilka (4-7) rzędów małych probówek, trzy probówki z rzędu. Do pierwszych probówek z każdego rzędu wlać 0,9 ml ekstraktu z badanego mięsa; w drugim 0,9 ml soli fizjologicznej, aw trzecim taka sama objętość normalnych surowic różnych zwierząt w rozcieńczeniu 1:1000.

We wszystkich trzech probówkach pierwszego rzędu dodać 0,1 ml wytrącającego się białka krowiego różnymi pipetami Pasteura, 0,1 ml wytrącającego się białka końskiego w probówkach drugiego rzędu, 0,1 ml wytrącającej się surowicy świńskiej w probówkach trzeciego rząd , w probówkach innych rzędów - według tej samej ilości surowicy owiec, kóz, psów.

Reakcję odczytuje się na ciemnym tle. Za reakcję dodatnią uznaje się pojawienie się mętnego białego pierścienia w miejscu kontaktu cieczy w ciągu pierwszych minut po dodaniu wytrącającego się serum. Reakcja będzie specyficzna, jeśli w ciągu 1 godziny po dodaniu wytrącającej się surowicy do ekstraktu pojawi się mętny biały pierścień; wytrącanie powstałe później jest uważane za niespecyficzne.

Dodatnia reakcja w pierwszej i trzeciej probówce z tego samego rzędu wskazuje, że badane mięso należy do zwierzęcia, które odpowiada specyficzności surowicy. We wszystkich pozostałych rzędach w pierwszych probówkach reakcja powinna być ujemna. A w trzeciej probówce - pozytywny. W drugich probówkach wszystkich rzędów (próbka kontrolna z solą fizjologiczną) reakcja powinna być ujemna.

Np. jeśli okazał się, że badany ekstrakt został wytworzony z mięsa końskiego, to wynik reakcji we wszystkich probówkach powinien być następujący (tab. 14).